En mars 1845, à peine arrivées à Bytown (Ottawa), Élisabeth Bruyère et ses compagnes ouvrent une école, un hôpital, un orphelinat et un foyer d’accueil pour personnes âgées. Sans tarder, elles organisent les visites à domicile, des cours du soir pour les mamans et répondent sans hésiter aux nombreux cris du cœur d’une population en souffrance. En 1847, c’est l’ouverture du Foyer Saint-Raphaël, à Bytown, pour les personnes émigrées sans emploi. Cette même année, les Sœurs se dévouent aussi auprès des immigrants irlandais atteints du typhus qui arrivent par bateau.
Dès 1848, Mère Bruyère répond à l’appel de l’Église et envoie des Sœurs en mission dans une petite localité près de Cornwall dans le sud-est de l’Ontario. Les Sœurs ouvrent un pensionnat et enseignent aux jeunes de la région. La mission ne durera que trois ans.
De 1849 à 1869, Mère Bruyère et ses consœurs s’appliquent à consolider les œuvres dans la ville de Bytown afin de répondre aux besoins toujours grandissants de la population. C’est ainsi qu’en 1849, le premier pensionnat s'ouvre pour accueillir les jeunes filles sur la rue Saint-Patrick. En juin 1850, la communauté déménage à la Maison mère actuelle, située sur la rue Bruyère. Depuis décembre 1865, les Sœurs logent les nombreux protégés dans une maison sur la rue Bruyère. En mai 1868, l’orphelinat de pierre est établi à l’angle Sussex et Cathcart. En plus de l’école et du pensionnat, les Sœurs ouvrent l’Académie Sainte-Marie, en 1865, permettant à un plus grand nombre d’accéder à l’éducation. Enfin, en 1866, l’Hôpital Général d’Ottawa est prêt et les patients y sont transférés. En 1869, la Congrégation achète l’hôtel Mathews à Ottawa pour y fonder le Pensionnat Notre-Dame-du-Sacré-Cœur (couvent de la rue Rideau). Les pensionnaires qui demeuraient à la Maison mère déménagent dans le nouvel établissement.
Dès la fin du 19e siècle, la Communauté prend une grande part dans l’éducation des jeunes franco-ontariens dans les villes à l’est d’Ottawa. Elles ont été présentes dans les municipalités suivantes : Orléans, Embrun, Hawkesbury, Casselman, Rockland, Bourget, L’Orignal, Clarence Creek, Limoges, Alfred, Chute-à-Blondeau et Saint-Pascal-Baylon.
La Congrégation répond favorablement à la demande des Oblats de Marie-Immaculée d’envoyer des Sœurs à la mission Saint-Claude pour seconder leur apostolat. C’est ainsi qu’en 1866, deux religieuses quittent Ottawa pour s’installer dans la région de l’Abitibi-Témiscamingue. Au fils des années, les Sœurs sont appelées à fonder des écoles et des hôpitaux dans plusieurs villes de la région, c’est-à-dire : Ville-Marie, Rouyn, Notre-Dame-du-Nord, Noranda, Guérin, Rollet, Montbeillard, Angliers, Rémigny et McWaters.
C’est à partir de 1867 que la communauté s’installe en Outaouais. Entre 1867 et 1869, les religieuses traversent la rivière des Outaouais pour ouvrir le pensionnat Notre-Dame-de-la-Merci à Aylmer et une école à Hull, aujourd’hui connu sous le nom d'École secondaire Saint-Joseph. Elles vont à Buckingham pour fonder le couvent Saint-Laurent et continuent jusqu’à Montebello pour y installer un pensionnat qui deviendra l’Institut familial Notre-Dame-du-Bonsecours. Les religieuses vont aussi œuvrer dans plusieurs autres localités de la région, dont notamment : Maniwaki où elles ouvrent une école et un hôpital en 1870, Pointe-Gatineau, Papineauville, Gatineau Mills, Fort-Coulonge, Notre-Dame-de-la-Salette, Chénéville, Lac Cayamant et Masson.
Puis, en 1868, c’est à Pembroke que les religieuses vont enseigner et dix ans plus tard, elles y ouvrent un hôpital. En 1873, c’est dans la localité d’Eganville, que les religieuses vont enseigner.
Le dernier envoi en mission de Mère Bruyère, avant son décès, est pour le Centre-du-Québec, à Saint-François-du-Lac. Les Sœurs y fondent le pensionnat Saint-François-Xavier, en 1876. Il est à noter que la Congrégation a aussi été présente à Odanak de 1903 à 1959, à Cap-de-la-Madeleine de 1951 à 2007 et à Drummondville de 1952 à 2003.
La région du nord-est de l’Ontario voit les Sœurs de la Charité arriver en 1878 en premier lieu à Mattawa où elles sont mandatées pour prendre soin des malades et enseigner aux enfants. C’est ensuite à Sudbury qu’elles s’installent pour continuer ce même mandat. Elles y fondent aussi un hôpital en 1896 et un autre, en 1898, à Sault-Sainte-Marie. La Congrégation fait bâtir le Collège Notre-Dame et crée, en parallèle, une multitude d’œuvres sociales afin de répondre aux besoins de la population. Ayant toujours à cœur la mission éducative, les Sœurs enseignent ou travaillent en pastorale dans les villes suivantes : Chelmsford, Verner, Kapuskasing, Noëlville, Moonbeam, Cartier, Hanmer, Smooth Rock Falls, Opasatika, Fauquier et Blezard Valley.
Au même moment, un contingent part pour fonder le pensionnat Saint-Louis à Pointe-du-Lac, en Montérégie. À noter que les Sœurs sont présentes dans d’autres localités de la région : à Saint-Valérien de 1968 à 1988, à Rigaud de 1969 à 1985, à Rougemont de 1969 à 2009 et à Richelieu de 1985 à 2001.
Les années 1950 marquent aussi l’acceptation de la communauté de fonder dans trois localités du sud-ouest de l’Ontario, c’est-à-dire : Pain Court, Sarnia et Windsor.
Un groupe de Sœurs part pour la Baie-James en 1902. Les Sœurs de la Charité y demeurent jusqu’en 2005. Elles ont été présentes dans les missions suivantes : Fort Albany, Fort George, Moosonee et Attawapiskat.
À partir de 1916, la Congrégation accepte de s’installer dans la ville de Shawinigan en Mauricie où les Sœurs enseignent dans les paroisses de Saint-Bernard, de Saint-Marc, et plus tard du Christ-Roi où, à partir de 1931, elles fondent l’hôpital Sainte-Thérèse.
La présence des Sœurs dans les Laurentides commence en 1932 à Mont-Laurier et à Saint-Jérôme, villes dans lesquelles elles ouvrent des foyers pour personnes âgées. Les religieuses sont aussi présentes à Lachute, à L’Annonciation et à Bellefeuille.
À partir de 1941, la Congrégation accepte trois missions dans deux villes de la province de l’Alberta et plus précisément à Spirit River et à Tangente. Les Sœurs travaillent à l’éducation et aux soins des malades jusqu’en 1971.